Negatiivinen värjäysperusta, tekniikka, edut ja haitat

negatiivinen värjäys Se on erityinen värjäysmenetelmä kapselin läsnäolon korostamiseksi joissakin mikro-organismeissa Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae ja Cryptococcus neoformans-, kliinisistä näytteistä tai puhtaista viljelmistä.

Suora näyte, jota yleisesti käytetään negatiivisen värjäytymisen levittämiseen, on aivo-selkäydinneste. Tämä tekniikka on nopea vaihtoehto meningiitin oletetulle diagnoosille, erityisesti Cryptococcus neoformans.

Samoin tämä tahra voidaan levittää röyhkeisiin ja steriileihin nesteisiin yleensä sekä nuorista puhtaista viljelmistä saaduille kannoille. Tämä tekniikka käyttää nigrosiinia tai kiinalaista mustetta sen toteuttamiseen; Siksi on hyvin yksinkertainen ja taloudellinen menetelmä, joka tarjoaa lyhyessä ajassa paljon diagnostista tietoa.

Tässä mielessä jokainen laboratorio pystyy suorittamaan tämän värin. Laboratoriossa on tietenkin oltava pätevä henkilökunta, joka pystyy tunnistamaan hiivojen hiivat Cryptococcus neoformans eristetään tai heikkenevät ja erotetaan ne leukosyyteistä ja esineistä, joita näyte voi esiintyä.

indeksi

• 1 Säätiö
• 2 Tekniikka
  • 2.1 Materiaalit
  • 2.2 Näytteenottotiedot
  • 2.3 Tekniikan toteutus suorilla näytteillä
  • 2.4 Teknologian toteuttaminen viljelmän kannoilla
  • 2.5 Tarkkailu mikroskoopissa
• 3 Edut
• 4 Haitta
• 5 Kudoksen värjäys intialaisella musteella
• 6 Viitteet

perusta

Nigrosiini ja intialainen muste toimivat samalla tavalla; sen vuoksi kumpaakin näistä aineista voidaan käyttää keskenään vaihtelevasti.

Tätä tekniikkaa kutsutaan negatiiviseksi värjäykseksi, koska se toimii toisten väritysmenetelmien vastaisesti. Tässä on jäljelle jäävä rakenne, jota haetaan tai jota haluat nähdä; eli mikro-organismit.

Siksi väritys perustuu värjäysmyrskyn pohjaan tummalla värillä. Tässä skenaariossa rajattuja rakenteita korostetaan vaalealla tai värittömällä värillä.

Yleensä hiivoja havaitaan estävinä, joita ympäröi kirkas halo, joka vastaa kapselia. Tämä johtuu siitä, että kiinalainen muste ja nigrosiini ovat aineita, jotka eivät kykene tunkeutumaan polysakkaridiin, joka muodostaa elävien mikro-organismien kapselin.

On syytä huomata, että muut rakenteet, jotka voivat olla läsnä suorassa näytteessä, kuten leukosyytit tai punasolut, eivät tunkeudu.

Nyt, jos mikro-organismit ovat kuolleita, tinktuura voi tunkeutua niiden sisälle siten, että tämä värjäys on myös hyödyllinen mikro-organismien elinkelpoisuuden arvioimiseksi.

tekniikka

tarvikkeet

nigrosiiniväri-

Nigrosiini on nimensä mukainen mustalla värillä. Se on synteettinen aine, joka saadaan kuumentamalla orgaanisten yhdisteiden seosta - kuten nitrobentsiini, aniliini ja aniliinihydrokloridi - käyttämällä katalyyttiä (rautaa tai kuparia) mainitussa reaktiossa..

Kiinalainen muste

Kiinalainen muste on aine, jota käytetään pääasiassa aasialaisten kirjoittamiseen, taideteosten tekemiseen ja yksiväriseen maalaukseen. Se on erittäin suosittu kiinalaisessa kulttuurissa.

Se saadaan kalvaväristä, joka on sekoitettu jauhetun kivihiilen kanssa, joka on pieni hartsipuiden palamistuote.

On myös mahdollista valmistaa se hiilivetyjen (kasviöljyjen) polttamisen nokista sekä proteiinigeelatiinia, joka antaa sille oikean konsistenssin hiilihiukkasten saostumisen estämiseksi.

Näytteenottotiedot

- Ei vaadi paastoa.

- CSF: n, syljen tai steriilin nesteen näytteessä on oltava vähintään 1 ml tilavuutta ja se on siirrettävä välittömästi huoneenlämpötilaan laboratoriossa.

- Erikoislääkärin on otettava CSF ja steriilit nestenäytteet.

- Se voi olla myös epäillyn kannan puhdas viljelmä, joka on liitetty edellä mainittuihin patogeeneihin.

Tekniikan toteutus suorilla näytteillä

- Näytteet on sentrifugoitava, sitten supernatantti heitetään pois ja sedimentti otetaan.

- Pisara sentrifugoitua materiaalia (sedimentti) ja tippa kiinalaista mustetta tai nigrosiinia asetetaan puhtaaseen liukumaan..

- Se on sekoitettava hyvin ja peitettävä peitekalvolla, jotta pudotus levisi kuin ohut kalvo ylittämättä reunoja.

- Tämän jälkeen valmiste on asennettu mikroskooppiin.

- Jos valmiste on liian tumma, se voidaan laimentaa vedellä.

Tekniikan suorittaminen viljelmän kannoilla

- Erittäin pieni osa nuoresta viljelmästä otetaan kylvöneulalla ja liuotetaan pisaraan kiinalaista mustetta, joka on aiemmin asetettu puhtaaseen liukumaan.

- Kansi on sijoitettu päälle.

- Se havaitaan mikroskoopissa 10X ja sitten 40X.

Voit myös liuottaa osan pesäkkeestä tislattuun veteen, ja sieltä ota tippa ja sekoita se musteen kanssa. Tällä tavoin valmiste ei ole niin paksu, että rakenteita voidaan tarkkailla erillään; Jos on taajamia, sitä ei havaita hyvin.

Toinen menetelmä on seuraava:

- Laita pisara viljelmää suspensioon liukun toisessa päässä.

- Laita pisara nigrosiinia samaan päähän ja sekoita.

- Laajenna näyte toisen liukukappaleen avulla, kuten tekisit hematologisen tahran.

- Anna kuivua ja tarkkailla mikroskoopin alla.

Tarkkailu mikroskoopissa

Ensin sinun on keskityttävä 10X-tavoitteeseen, jotta kenttä on laaja. Tämän jälkeen sinun pitäisi etsiä, jos on selkeitä tiloja; jos on, tarkenna 40X tarkistaaksesi tiedot.

hyöty

- Se on helppo suorittaa.

- Se on taloudellinen tekniikka.

- Tällä menetelmällä ei vaadita, että lika on kiinnitetty lämpöön tai kemikaaleihin; siksi mikro-organismeja havaitaan ilman vääristymiä.

- Tuoretta valmistetta ei tarvitse kuivata, joten se voidaan havaita välittömästi ja tuottaa nopeasti tuloksia.

haitta

Kokoonpanon jälkeen tuoreet valmisteet tulee tarkkailla välittömästi; jos he saavat kuivua, niitä ei ole enää mahdollista tarkkailla ja uutta.

Kudoksen värjäys Intian musteella

Toinen funktio, jota kiinalainen muste voi täyttää, on patologian laboratorioissa. Tätä sovelletaan kudosnäytteisiin, jotka on poistettu kirurgisesti kasvaimen resektion marginaalien osoittamiseksi.

Merkitty kudos ruiskutetaan etikkahapolla. Tämä toimii mordanttina ja estää musteen pääsemisen pois, kun kudos altistetaan rutiininomaiselle käsittelylle biopsian valmistelua varten.

Menettely koostuu kudoksen uimisesta alkoholissa ja ksyleenissä ja sitten imeytymisestä parafiinivahaan. Tämä merkintä ohjaa patologia, kun se tarkkailee kudosta, mikä osoittaa, missä kirurgisen resektion marginaali tai muu kiinnostava kohta on.

viittaukset

1. "Nigrosiini". Wikipedia, vapaa tietosanakirja. 11.7.2017, 22:46 UTC. 6. tammikuuta 2019, 16:56: en.wikipedia.org
2. "Kiinalainen muste". Wikipedia, vapaa tietosanakirja. 1. lokakuuta 2018, 03:08 UTC. 6. tammikuuta 2019, 18:20: en.wikipedia.org/
3. Silva L, Silva C, Fernández N, Bueno C, Torres J, Rico M, Macías J ja yhteistyökumppanit. (2006). Extremaduran autonomisen yhteisön työvoimahenkilöstö. Erityisohjelma IV osa. Toimituksellinen MAD. Sevilla-Espanja, s. 211-212.
4. Silva M, García M, Corrales J, Ponce E. (2006), Galician terveyspalvelun (SERGAS) erikoislääkäri. Aiheen määrä 2. Toimituksellinen MAD. Sevilla-Espanja, s. 79-80.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scottin mikrobiologinen diagnoosi. 12 toim. Argentiinassa. Panamericana S.A Toimituksellinen