Biokemiallisten testien tyypit, mitä ne ovat ja mikä on tärkeää



biokemialliset testit mikrobiologiassa ne ovat kemiallisia testejä, jotka suoritetaan näytteessä oleville mikro-organismeille niiden tunnistamiseksi; Nämä mikro-organismit ovat yleensä bakteereja. Mikrobiologin käytettävissä on suuri määrä biokemiallisia testejä.

Näiden testien valinta perustuu kuitenkin alustaviin havaintoihin, kuten Gram-värjäysmalliin ja kasvumerkkeihin, joiden avulla bakteerit voidaan kohdistaa tiettyyn luokkaan. Biokemialliset testit perustuvat pääasiassa kunkin bakteerityypin metabolisiin ominaisuuksiin. 

Kaikilla bakteereilla ei ole samat ominaisuudet, joten tutkitaan, onko niillä jokin tietty entsyymi lisäämällä substraattia ja odottamalla reaktion tapahtumista. Yleensä tämä määritys annetaan värien tai pH: n muutoksena viljelyalustassa.

Alle 15 biokemiallista testiä tarvitaan usein bakteerin luotettavaksi tunnistamiseksi lajin tasolle. Biokemiallisten testien suorittaminen voi lisätä luottamusta tunnistamiseen.

Suurin osa näistä biokemiallisista testeistä suoritetaan seerumissa tai veriplasmassa. Ne voidaan kuitenkin suorittaa myös muissa biologisissa eritteissä, kuten virtsassa, aivo-selkäydinnesteessä, keuhkoputken nesteessä ja ulosteessa..

indeksi

  • 1 Luokitus
    • 1.1 Universal
    • 1.2 Erot
    • 1.3 Erityinen
  • 2 Biokemiallisten testien tyypit
    • 2.1 Kataasin testi
    • 2.2 Oksidaasitesti
    • 2.3 Suolaisen mannitoli-agarin (MSA) testi
    • 2.4 Koagulaasitestit
    • 2.5 Ureaasin testi
  • 3 Mitkä ovat biokemialliset testit??
  • 4 Tärkeys
  • 5 Viitteet

luokitus

Biokemialliset testit voidaan jakaa kolmeen ryhmään:

yleismaailmallinen

Nämä ovat testejä, jotka voidaan suorittaa missä tahansa näytteessä ja jotka ohjaavat mikrobiologia seuraaviin biokemiallisiin testeihin, jotka on suoritettava luotettavan tunnistuksen saamiseksi..

esimerkki

Katalaasin ja oksidaasin testi.

erot

Nämä ovat testejä, jotka suoritetaan näytteessä olevien mikro-organismien tunnistamiseksi lajin tasolle.

Tunnistus tehdään testien yhdistelmän tulosten perusteella, koska yksittäiset tulokset eivät ole riittävän informatiivisia tunnistuksen tekemiseksi.

esimerkki

IMViC-testit ja sokerin käyttökoe.

erityinen

Ne ovat erityisiä testejä tietylle lajiryhmälle tai lajin alatyypille. Nämä testit tehdään yleensä vahvistamaan tai tunnistamaan alalajin tasolla. Yksilölliset testit ovat itse informatiivisia.

esimerkki

Y-glutamyyliaminopeptidaasin testi.

Biokemiallisten testien tyypit

Katalaasitesti

Katalaasitesti on testi, jolla osoitetaan katalaasientsyymin läsnäolo hajottamalla vetyperoksidi happeen ja veteen. Pieni määrä bakteereja lisätään vesipitoisen peroksidin pisaraan (3%) liukuhihnassa.

Katalaasitesti on yksinkertainen testi, jota mikrobiologit käyttävät bakteerilajien tunnistamiseen ja joidenkin mikrobien kykyä hajottaa vetyperoksidia tuottamalla katalaasientsyymi.

Jos havaitaan hapen kuplia, se tarkoittaa, että bakteerilla on katalaasientsyymi, koska se katalysoi vetyperoksidin hajoamista hapeksi ja vedeksi. Sitten sanotaan, että organismi on katalaasi-positiivinen (esimerkiksi: Staphylococcus aureus).

Oksidaasitesti

Tätä testiä käytetään sellaisten mikro-organismien tunnistamiseen, jotka sisältävät sytokromioksidaasin entsyymiä (tärkeä elektronin kuljetusketjussa). Sitä käytetään yleisesti erottamaan perheet Enterobacteriaceae ja Pseudomadaceae.

Sytokromioksidaasi siirtää elektronit elektroninsiirtoketjusta happeen (lopullinen elektronin akseptori) ja vähentää sitä veteen. Oksidaasitestit tarjoavat keinotekoisia elektronidonori- ja akseptorimolekyylejä.

Kun elektronidonori hapetetaan sytokromioksidaasin vaikutuksesta, elatusaine muuttuu tummaksi violetiksi ja sitä pidetään positiivisena tuloksena. Mikro-organismi Pseudomonas aeruginosa on esimerkki positiivisesta oksidaasibakteerista.

Suolattu mannitoli-agar-testi (MSA)

Tämäntyyppinen testi on sekä valikoiva että differentiaalinen. MSA valitsee organismeja, jotka kykenevät elämään sellaisissa ympäristöissä, joissa on suuria suolapitoisuuksia, kuten. \ T stafylokokki verrattuna lajiin Streptococcus, joiden kasvua estetään näissä olosuhteissa.

Erotuskomponentti tässä testissä on sokeri-mannitoli. Organismit, jotka kykenevät käyttämään mannitolia elintarvikelähteenä, tuottavat fermentaation sivutuotteita, jotka ovat happamia ja siten alentavat väliaineen pH: ta..

Väliaineen happamuus saa pH-indikaattorin, fenolin punaisen, muuttumaan keltaiseksi. Esimerkkejä bakteerilajeista, jotka voidaan erottaa tällä menetelmällä, ovat: Staphylococcus aureus (positiivinen, koska se fermentoi mannitolia) ja Staphylococcus epidermidis (negatiivinen, koska mannitoli ei fermentoidu).

Koagulaasitesti

Koagulaasi on entsyymi, joka auttaa veren plasmaa koaguloitumaan. Tämä testi suoritetaan positiivisten grampositiivisten ja katalaasipositiivisten bakteerien tunnistamiseksi Staphylococcus aureus (positiivinen koagulaasi) Itse asiassa koagulaasi on tämän bakteerilajin virulenssitekijä.

Hyytymien muodostuminen tämän bakteerin aiheuttaman infektion ympärille todennäköisesti suojaa sitä fagosytoosilta. Tämä testi on erittäin hyödyllinen, kun haluat erottaa toisistaan Staphylococcus aureus muiden lajien lajista stafylokokki jotka ovat negatiivisia koagulaaseja.

Ureaasin testi

Tätä testiä käytetään tunnistamaan bakteerit, jotka kykenevät hydrolysoimaan ureaa entsyymin avulla. Sitä käytetään yleisesti sukupuolen erottamiseen Proteus muiden enteeristen bakteerien.

Urean hydrolyysi tuottaa ammoniakkia yhtenä sen tuotteista. Tämä heikko emäs lisää pH-arvoa yli 8,4 ja pH-indikaattori (fenoli punainen) muuttuu keltaisesta vaaleanpunaiseksi. Esimerkki positiivisesta ureaasibakteerista on Proteus mirabilis.

Mitkä ovat biokemialliset testit??

Mikrobiologian biokemiallisia testejä käytetään mikrobien aiheuttamien sairauksien diagnosointiin ja niiden torjumiseksi annettujen hoitojen seurantaan. Lisäksi niitä käytetään tartuntatautien seulontaan ja niiden ennustamiseen..

Mikro-organismien biokemiallinen tunnistaminen tarjoaa käsityksen siitä, mitä nämä mikro-organismit pystyvät tekemään, koska ne voivat erottaa saman lajin eri kantoja tietyillä biokemiallisilla profiileilla.

Eri entsymaattisten toimintojen erot kertovat mikro-organismin ekologiasta, fysiologiasta tai luonnollisesta elinympäristöstä, joita joissakin tapauksissa voidaan pitää tärkeinä tiedoina.

tärkeys

Rakenteelliset erot bakteerien muodon, koon ja sijoittelun suhteen auttavat tunnistamisprosessissa hyvin vähän, koska bakteereita on monia, joilla on samanlainen muoto, koko ja sijoitus.

Tästä syystä bakteerien tunnistaminen perustuu ennen kaikkea niiden biokemiallisten toimintojen eroihin.

Jokaisella bakteerilajilla on hyvin määritelty joukko aineenvaihduntatoimintoja, jotka eroavat kaikista muista lajeista. Nämä biokemialliset "sormenjäljet" ovat bakteerientsyymien ohjaamia ominaisuuksia.

Näin ollen biokemialliset testit ovat tärkeitä, koska ne auttavat tutkijaa tunnistamaan näytteessä olevat patogeenit oikein, ja näin ollen ne voivat suositella asianmukaista hoitoa potilaalle..

viittaukset

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Kliininen biokemia (8. painos). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., ja Cowan, S. T. (1952). Biokemialliset menetelmät bakteriologiaa varten. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187 - 1977.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Kliininen biokemia (5. painos). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Käytännön käsikirja mikrobiologiasta (2. painos). CRC Press.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratoriomenetelmät elintarvikkeiden mikrobiologiassa (3. ed.). Academic Press.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Käytännön mikrobiologia. BI Julkaisut Pvt Ltd.