Soijaliemi tripticaseína säätiö, valmistelu ja käyttö

soijaliha tripticaseína Se on nestemäinen kasvualusta, joka on hyvin ravitsevaa ja ei-selektiivistä. Suuri monipuolisuus on mikrobiologian laboratoriossa yksi yleisimmin käytetyistä nestemäisistä kasvualustoista.

Sitä kutsutaan myös liemi tripticasan soijaksi tai sulatetuksi kaseiinisoooksi, jonka lyhenne on englanninkielinen lyhenne TSB. Tryptic olen Liemi tai CST sen lyhenteeksi espanjaksi. Sen käyttö on hyvin vaihteleva sen koostumuksen vuoksi. Se koostuu tripteiinistä, soijapeptonista, natriumkloridista, dikaliumfosfaatista ja glukoosista.

Se kykenee toistamaan kliinisesti tärkeitä patogeenisiä bakteereja, mukaan lukien ne, jotka ovat ravitsemuksellisesti vaativia ja anaerobisia bakteereja. Myös jotkut opportunistiset sienet ja epäpuhtaudet voivat kehittyä tässä ympäristössä.

Korkean ravintoarvonsa ansiosta sillä on suuri herkkyys mikrobi-kontaminaation havaitsemiseksi, minkä vuoksi USDA Animal and Plant Health Inspection Service valitsi sen rokotteiden mikrobiologiseen analyysiin..

Samoin tripticase soijakeitto täyttää eri farmakopean (Euroopan EP, japanilainen JP ja Pohjois-Amerikan USP) vaatimukset teollisuustuotteiden, kuten kosmetiikan ja elintarvikkeiden, mikrobiologisessa tutkimuksessa..

Toisaalta on syytä mainita, että huolimatta siitä, että tämä väline on erittäin hyödyllinen, se on suhteellisen edullinen, joten se on edullinen useimmille mikrobiologian laboratorioille. Se on myös erittäin helppo valmistaa.

indeksi

• 1 Säätiö
• 2 Valmistelu
  • 2.1. Tryptikamiinin soija
  • 2.2 - Tripticasein-soijaliuoksen asukkaat
• 3 Käytä
• 4 Seeded
• 5 Laadunvalvonta
• 6 Rajoitukset
• 7 Viitteet

perusta

Tripteína, peptoni ja glukoosi antavat hänelle välttämättömät ravitsemukselliset ominaisuudet, jotta se muuttuu ihanteelliseksi väliaineeksi nopean mikrobiologisen kehityksen kannalta..

Noin 6 - 8 tuntia inkubointia voidaan jo nähdä useimmissa mikro-organismeissa. On kuitenkin hitaasti kasvavia kantoja, jotka voivat kestää päiviä kasvamaan.

Natriumkloridi ja dikaliumfosfaatti toimivat vastaavasti osmoottisena tasapainona ja pH-säätäjänä. Kasvun läsnäolosta on osoituksena sameuden esiintyminen väliaineessa; jos kasvua ei ole, väliaine on läpikuultava.

Vaalean värinsä ansiosta on mahdollista tarkkailla pigmenttien tuotantoa, kuten esineen alussa olevassa kuvassa esitettyä, pigmenttiä, joka vastaa sen tuottamaa pigmenttiä. Pseudomonas aeruginosa. 

valmistelu

-Tryptinen soijapapu

Tripticase-soijaliemen valmistamiseksi punnitaan 30 grammaa dehydratoitua kaupallista elatusainetta digitaalisessa mittakaavassa. Sitten se liukenee litraan tislattua vettä.

Seoksen annetaan seistä 5 minuuttia ja tuodaan sitten lämmönlähteeseen väliaineen liukenemiseen. Sitä on ravisteltava usein, kun kiehuu 1 minuutti.

Kun se on liuennut, se jaetaan sopivaan koon putkiin tarpeen mukaan. Voidaan käyttää putkia, joissa on puuvillatulppa tai bakeliittikorkki. Tämän jälkeen putket steriloidaan väliaineella autoklaavissa 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan.

Väliaineen pH: n tulisi olla 7,3 ± 0,2

On otettava huomioon, että kuivatun viljelyalustan väri on vaalea beige ja se on säilytettävä 10 - 35 ° C: ssa kuivassa paikassa. Valmistettu liemi on kevyt keltainen ja se on säilytettävä jääkaapissa (2–8 ° C).

-Tripticasein-soijaliemen vaihtelut

Trypticamiinimodifioitua soijalientä voidaan valmistaa lisäämällä sappisuoloja ja novobiosiinia, jotta se olisi selektiivinen eristämisen kannalta. E. coli. Toinen vaihtoehto samaan tarkoitukseen on valmistaa vatsomysiinillä, cefiximellä ja telluurilla (2,5 μg / ml) täydennettyä tripticase-soijalientä.

Toisaalta trypticasein-soijaliemeen voidaan lisätä enemmän glukoosia (0,25%), kun tavoitteena on stimuloida biofilmin muodostumista.

käyttö

Se on tarpeeksi ravitsevaa vaativien tai ärsyttävien bakteerien, kuten Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp ja Brucella sp, ei tarvitse täydentää verta tai seerumia.

Samoin jotkut sienet voivat kehittyä tässä liemessä, kuten Candida albicans -kompleksi, Aspergillus sp ja Histoplasma capsulatum.

Lisäksi tämä elatusaine anaerobisissa olosuhteissa on ihanteellinen Clostridium-sukuun kuuluvien bakteerien talteenottoon sekä kliinisesti tärkeisiin anaerobisiin, ei-sporuloituihin bakteereihin..

Jos lisätään 6,5% natriumkloridia, voidaan käyttää Enterococcus- ja muiden ryhmän D streptokokkien kasvua.

Tutkimustasolla se on ollut erittäin hyödyllinen eri protokollissa, erityisesti biofilmejä tai biofilmejä muodostavien bakteerien tutkimuksessa. Sitä käytetään myös valmistamaan bakteriaalista suspensiota 0,5%: ssa Mac Farlandia, joka on välttämätön antibiootin suorittamiseksi Kirby- ja Bauer-menetelmällä..

Tällöin otetaan 3 - 5 samankaltaista pesäkettä ja emulgoidaan 4-5 ml: aan trypticasein-soijalientä. Sitten sitä inkuboidaan 2 - 6 tuntia 35 - 37 ° C: ssa ja sen jälkeen säädetään haluttuun konsentraatioon käyttäen steriiliä suolaliuosta. Tryptikaasin soijaliemiä ei saa käyttää 18–24 tunnin inkubointiin.

istutettu

Näyte voidaan kylvää suoraan tai viljellyt puhtaat pesäkkeet selektiivisistä väliaineista. Inokulaatin tulisi olla pieni, jotta väliaine ei pilvisi ennen inkubointia.

Normaalisti inkuboidaan 37 ° C: ssa aerobioosissa 24 tunnin ajan, mutta nämä olosuhteet voivat vaihdella riippuen haetusta mikro-organismista. Sitä voidaan myös inkuboida anaerobisissa olosuhteissa 37 ° C: ssa useita päiviä tarvittaessa. Esimerkiksi vaativissa tai hitaasti kasvavissa mikro-organismeissa voidaan inkuboida jopa 7 päivää.

Farmaseuttisten aineiden mikrobiologisessa analyysissä, kuten rokotteissa, pöytäkirjat ovat tiukempia. Näissä tapauksissa liemi ilman kasvua ei hävitä, ennen kuin se saavuttaa 14 päivän jatkuvan inkuboinnin.

Laadunvalvonta

Jokaisen valmistetun erän osalta 1 tai 2 putkea tulisi inkuboida ilman inokulaatiota steriiliyden osoittamiseksi. Sen on pysyttävä ennallaan.

Voit myös istuttaa tunnettuja kantoja arvioidakseen niiden käyttäytymistä. Käytettävissä olevien kantojen joukossa ovat:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 tai 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Kaikissa tapauksissa kasvun on oltava tyydyttävä jokaiselle mikro-organismille sopivan ilmakehän ja lämpötilan olosuhteissa.

rajoituksia

-Glukoosin fermentointi aiheuttaa väliaineen pH: n vähenemisen happojen tuotannolla. Tämä voi olla epäedullinen joidenkin happamuutta herkkien mikro-organismien selviytymiselle.

-Se ei ole suositeltavaa kantojen ylläpitämiseksi, koska happamuuden lisäksi bakteerit heikentävät muutaman päivän kuluttua ravinteita ja näin ollen kerääntyvät myrkyllisiä aineita, jotka tekevät ympäristöstä epämiellyttävän.

-Kaikkia steriiliysprotokollia on hoidettava huolellisesti, koska liemet ovat helposti saastuttavia.

-Tripticaseinin valmistamisen jälkeen soijaliemet eivät yritä siirtää liemiä toiseen steriiliin putkeen, koska tämäntyyppiset ohjaukset ovat erittäin alttiita kontaminaatiolle.

viittaukset

1. Cona E. Edellytykset hyvän herkkyystutkimuksen suorittamiseksi agar-diffuusiotestillä. Rev. Chil. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Saatavilla osoitteessa: scielo.org
2. Britannian laboratorio Tryteiini-soijaliemi. 2015. Saatavilla: britanialab.com
3. MCD-laboratorio. Trytica-soijaliemi. Saatavana osoitteessa: electronic-systems.com
4. Neogeenilaboratorio. Soy Broth Triptyykki. Saatavilla osoitteessa: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scottin mikrobiologinen diagnoosi. 12 toim. Toimituksellinen Panamericana S.A. Argentiina.
6. Rojas T, Vásquez Y, Reyes D, Martínez C, Medina L. Magneettisen immunoseparaation menetelmän arviointi. Escherichia coli O157: H7 maitovoiteissa. ALAN. 2006; 56 (3): 257 - 264. Saatavilla osoitteessa: scielo.org.ve
7. Gil M, Merchán K, Quevedo G, Sánchez A, Nicita G, Rojas T, Sánchez J, Finol M. Biofilm-muodostuminen eristetyssä Staphylococcus aureus antimikrobisen herkkyyden ja kliinisen alkuperän mukaan. Vitae. 2015; 62 (1): 1-8. Saatavilla osoitteessa: saber.ucv.ve
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Moreno M, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. Escherichia coli O157: H7 kaksoistarkoituksessa nautaeläinten nautojen näytteistä Mirandan kunnasta, Zulian osavaltiosta, Venezuelasta. Rev. Cient. (Maracaibo), 2007; 17 (3): 239 - 245. Saatavilla osoitteessa: scielo.org