MacConkey Agarin säätiö, valmistelu ja käyttö



MacConkey-agar Se on kiinteä viljelyväliaine, joka sallii yksinomaan Gram-negatiivisten bakteerien eristämisen. Tästä syystä se on valikoiva väliaine ja mahdollistaa myös erottamisen laktoosin fermentoinnista ja fermentoimattomasta bacillista, mikä tekee siitä erilaisen väliaineen. Se on yksi mikrobiologian laboratoriossa käytetyimmistä viljelyväliaineista.

Tätä elatusainetta käytetään pääasiassa perheeseen kuuluvien gramnegatiivisten bakteerien eristämiseen enterobacteriaceae, mukaan lukien opportunistiset ja enteropatogeeniset lajit.

Sitä voidaan käyttää myös erilaisten suolistossa olevien suolistossa olevien bakteerien eristämiseen, mutta ne eivät kuulu enterobacteriaceae, kuten Aeromonas sp, Plesiomonas sp, muun muassa.

Lopuksi se voi eristää muita gramnegatiivisia, käymättömiä glukoosibasileja, joita esiintyy ympäristössä, vedessä tai maaperässä, mutta jotka voivat joskus olla opportunistisia taudinaiheuttajia, kuten Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, muun muassa.

indeksi

  • 1 Säätiö
    • 1.1 MacConkey-agar
  • 2 Valmistelu
  • 3 Perinteisen MacConkey-agarin käyttö
  • 4 Muut MacConkey-agarin variantit
    • 4.1 MacConkey-agar, jossa on sorbitolia
    • 4.2 MacConkey Agar ilman kristalliviolettia tai suolaa
    • 4.3 MacConkey-agar cefoperatsonilla
    • 4.4 MacConkey Agar, joka on valmistettu 10% merivedestä v / v
  • 5 Viitteet

perusta

MacConkey Agar

Tämän alustan perustelu voidaan selittää sen osien kuvauksella, koska jokaisella on tarkoitus, joka määrittää sen ominaisuuden.

Sappisuolat ja violetti kristalli

Tässä mielessä MacConkey-agarilla on monimutkainen koostumus. Ensinnäkin se sisältää sappisuoloja ja violetti kristallia.

Nämä elementit ovat vastuussa grampositiivisten bakteerien ja joidenkin vaativien gram-negatiivisten bakteerien kasvun estämisestä. Se puolestaan ​​suosii gramnegatiivisten bakteerien kehittymistä, joita nämä aineet eivät vaikuta. Siksi se on valikoiva väline.

Sen sanotaan olevan hieman selektiivinen verrattuna muihin väliaineisiin, jotka myös estävät grampositiivisten bakteerien ja myös useimpien gram-negatiivisten bakteerien kasvua.

Se on erittäin selektiivinen tietylle suvulle, kuten TCBS-agarille, joka eristää Vibrio cholerae ja muut samankaltaiset halofiiliset ja alkalofiiliset lajit.

Peptonit, polyponit ja laktoosi

Sisältää aineita, jotka tuottavat tarvittavia ravintoaineita mikro-organismeille, jotka kehittyvät tässä elatusaineessa, kuten peptoneissa, polyptooneissa ja laktoosissa.

Laktoosi on keskeinen tekijä, jotta väliaine olisi differentiaalinen väliaine, koska mikro-organismit, joilla on kyky fermentoida laktoosia, kehittävät vahvoja vaaleanpunaisia ​​pesäkkeitä.

Jotkut bakteerit voivat fermentoida laktoosia hitaasti tai heikosti, kehittyen vaaleanpunaisia ​​pesäkkeitä ja pysyä positiivisena laktoosina.

Ne, jotka eivät fermentoi laktoosia, käyttävät peptoneja energialähteenä, jotka tuottavat ammoniakkia, alkaloivat elatusaineen. Siksi alkuperää olevat pesäkkeet ovat värittömiä tai läpinäkyviä.

PH-ilmaisin

Värinmuutos saavutetaan toisen olennaisen yhdisteen avulla, jossa on MacConkey-agari. Tämä yhdiste on pH-indikaattori, joka tässä tapauksessa on neutraali punainen.

Laktoosin käyminen tuottaa sekahappojen tuotantoa. Ne happamoittavat väliaineen pH-arvossa alle 6,8..

Tämä saa pH-indikaattorin kääntymään kohti voimakasta vaaleanväristä sävyä. Värin voimakkuus voi vaihdella lopullisen pH: n mukaan.

Tislattu vesi, natriumkloridi ja agar

Toisaalta se sisältää tislattua vettä ja natriumkloridia, jotka antavat hydraation ja osmoottisen tasapainon väliaineelle. Lopuksi väliaine sisältää agaria, joka on emäs, joka aikaansaa kiinteän väliaineen konsistenssin.

Valmistetun MacConkey-agar-väliaineen lopullisen pH: n on oltava 7,1 ± 0,2..

valmistelu

Yhdelle litralle MacConkey-agaria 50 g kuivattua väliainetta on punnittava, sitten asetettava fiolaan ja liuotettava yhteen litraan tislattua vettä. 10 minuutin lepoajan jälkeen se kuumennetaan sekoittamalla jatkuvasti, kunnes se kiehuu 1 minuutti.

Ampulli sijoitetaan sitten autoklaaviin ja steriloitiin 121 ° C: ssa 20 minuutin ajan. Se valmiiksi aika, poistettiin autoklaavista ja sen annettiin jäähtyä lämpötilaan 45 ° C, tämän jälkeen palvella steriiliin petrimaljaa laminaarivirtauskaapissa tai vastaan ​​Bunsen.

Annetaan jähmettyä ja säilyttää levyn pidikkeessä käänteisenä ja säilytetään kylmässä 2-8 ° C: ssa käyttöön asti.

MacConkey-agarin hankkimiseksi, joka estää Proteus-suvun tuottaman swarning-vaikutuksen, käytetään matalan suolan MacConkey-agaria..

Tavanomaisen MacConkey-agarin käyttö

MacConkey-agar on sisällytetty kaikkiin kasvatusväliaineisiin, jotka on järjestetty laboratoriossa vastaanotettujen kliinisten näytteiden kylvämiseen. Se on myös hyödyllinen elintarvikkeiden mikrobiologiassa ja ympäristön mikrobiologiassa.

Gramnegatiivisten bakteerien, jotka kasvavat tässä elatusaineessa, valikoima ilmaisee fenotyyppisiä ominaisuuksia, jotka auttavat kyseisten lajien oletettua diagnoosia. Esimerkiksi pesäkkeiden koko, väri, koostumus ja haju ovat joitakin ominaisuuksia, jotka voivat ohjata.

Tässä ympäristössä lajit Escherichia coli, Klebsiella sp ja Enterobacter sp tuottaa vahvoja vaaleanpunaisia ​​pesäkkeitä, joita ympäröi saostuneen sappi.

Niin paljon bakteereita kuin Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ja Hafnia sp ne voivat näkyä ilman väriä 24 tunnin kuluttua tai vaaleanpunainen 24-48 tunnin kuluessa.

Samoin Proteus, Edwadsiella, Salmonella ja Shigella suvut tuottavat värittömiä tai läpinäkyviä pesäkkeitä.

Muut MacConkey-agarin variantit

MacConkey-agarilla on muitakin variantteja, joilla on erityisiä tarkoituksia. Seuraavaksi ne mainitaan:

MacConkey-agari sorbitolilla

Tämä väliaine oli suunniteltu erottamaan enteropatogeeninen kanta (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7). \ t Escherichia coli.

Tämä väliaine muuttaa hiilihydraattilaktoosia sorbitoliksi. Kannat E. coli enterohemorrhagic O157: H7 eroaa lopusta, koska ne eivät fermentoi sorbitolia ja siksi saadaan läpinäkyviä pesäkkeitä, mutta loput kannoista E. coli jos ne fermentoivat sorbitolia ja pesäkkeet ovat vahvoja vaaleanpunaisia.

MacConkey Agar ilman kristalliviolettia tai suolaa

Tämä agar eroaa paljon klassisesta MacConkey-agarista, koska sillä ei ole kristalliviolettia, Gram-positiiviset bakteerit voivat kasvaa.

Toisaalta suolan puuttuminen estää eräiden suolistossa olevien bakteerien, kuten suvun, tuottaman agarin esiintymisen. Proteus, ja siten helpottaa kaikkien läsnä olevien bakteerien, mukaan lukien grampositiivisten bakteerien, eristämistä.

MacConkey-agar ja kefoperatsoni

Tämä MacConkey-agarin variantti suunniteltiin aluksi eristämään Laribacter hongkongensis ja myöhemmin he tajusivat, että se oli hyödyllinen Arcobacter butzleri.Molemmat ovat hieman kaarevia negatiivisia gram-bacilloja, jotka ovat resistenttejä kefoperatsonille.

Näitä bakteereja on viime aikoina yhdistetty aasialaisissa ja eurooppalaisissa yksilöissä saavutettuun gastroenteriitin ja ripulin syihin, jotka kehittyvät kahtena voimakkaana kehittyvänä patogeeninä.

Antibiootti voi estää mukana kasvien ruoansulatuskanavan, joka suosii kehitystä näiden bakteerien, estää mennä huomaamatta, koska ne vaativat 72 tuntia kasvaa.

MacConkey Agar, joka on valmistettu 10% merivedestä v / v

Tämä variantti on kuitenkin käyttökelpoinen arvioitaessa terveyden bakteerien määrä ulosteen saastuminen, mukaan luettuna kokonaiskolibakteerit ja ulosteen koliformien vapaa suolavettä (rantojen ja lahtien).

Cortez et ai 2013 osoittivat, että näin valmistetun väliaineen lisää merkittävästi talteenotto näiden mikro-organismien suolaliuos ympäristössä, verrattuna käyttöön MacConkey-agar valmistetaan tislatulla vedellä.

Tämä johtuu siitä, että modifioitu väliaine bakteerien kasvua, jotka ovat fysiologisesti lepotilassa "elinkelpoisia mutta viljeltäväksi" stimuloitiin sen vuoksi ei voida määrätä korvattaviksi tavanomaisissa.

viittaukset

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et ai. Cefoperazone MacConkey-agarin käyttö selektiiviseen eristykseen Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "MacConkey Agar." Wikipedia, vapaa tietosanakirja. 4. huhtikuuta 2018, 18:16 UTC. 29.12.2018, 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scottin mikrobiologinen diagnoosi. 12 toim. Argentiinassa. Panamericana S.A Toimituksellinen.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. (5. painos). Argentiina, toimittaja Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L Valbuena O. vaikutus valmistetut elatusaineet meriveden terveyteen indikaattoreita merivedessä kylpylöissä Chichiriviche, Falcon valtion, Venezuelan. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Käytännön kliininen mikrobiologia. Cadizin yliopisto, 2. painos. UCA-julkaisupalvelu.