Cetrimida-agarin perusta, käyttö, käyttö



cetrimidiagar tai cetrimidi on selektiivinen kiinteä viljelyväliaine, joka on suunniteltu eristämään Pseudomonas aeruginosa. Se perustuu tämän lajin ominaisten pigmenttien tuotannon korostamiseen ja se kehitettiin kuningas, Wardin ja Raneyn luoman Tech-agarin muunnoksesta..

Alkuperäinen kaava sisälsi magnesiumkloridisuoloja, kaliumsulfaattia, haiman gelatiinia ja agar-agaria. Kaavan muunnos koostui cetrimidin (setyylitrimetyyliammoniumbromidin) ja glyserolin lisäyksestä..

Cetrimidiagar on käyttökelpoinen näytteiden mikrobiologisessa tutkimuksessa, jossa on Pseudomonas aeruginosa. On huomattava, että tämä bakteeri on erittäin tärkeä, koska vaikka se on osa normaalia ympäristön mikrobiota, se käyttäytyy usein kuin opportunistinen patogeeni..

Siksi yksi tämän alkion aiheuttamista yleisimmistä ongelmista on sairaalainfektiot, toisin sanoen sairaalassa esiintyvät infektiot, jotka hyökkäävät masennettua immuunijärjestelmää sairastaviin potilaisiin..

Toisaalta, koska tämä mikro-organismi on kosteudeltaan affiniteettia, haavoittuvimmat saastumistavoitteet ovat: avustavat hengityslaitteet, lääkkeet, sumuttimet, vesilähteet, ilmastointilaitteet, desinfiointiaineet, saippualiuokset, injektoitavat liuokset, avoimet haavat , katetreja, virtsakatetreja, mm.

Tässä mielessä cetrimidiagar on käyttökelpoinen mikrobiologisten kontrollien ja viljelykasvien suorittamiseksi aiemmin nimetyille elementeille.

indeksi

  • 1 Säätiö
    • 1.1 Tulkkaus
  • 2 Valmistelu
  • 3 Käyttö
  • 4 Seeded
  • 5 Rajoitukset
  • 6 Laadunvalvonta
  • 7 Viitteet

perusta

Cetrimidiagar perustuu väliaineen kykyyn edistää kasvua P. aeruginosa, stimuloivat niiden pigmenttien tuotantoa ja puolestaan ​​estävät muiden mikro-organismien kasvua.

Nämä ominaisuudet johtuvat siitä, että jokainen sen komponentti täyttää tehtävänsä. Läsnä oleva gelatiinipeptoni toimii typen, vitamiinien ja kivennäisaineiden lähteenä. Glyseroli tai glyseriini toimii hiililähteenä.

Cetrimidi (setyylitrimetyyliammoniumbromidi) on puolestaan ​​aine, joka estää muiden bakteerien kasvua kuin P. aeruginosa, mukaan lukien muut samaan sukuun kuuluvat lajit.

Inhibointi tapahtuu, koska setramidi toimii kationisena pesuaineena, joka destabilisoi useimpien bakteerien plasmamembraania, lukuun ottamatta P. aeruginosa ja jotkut muut, jotka onnistuvat selviytymään.

Toisaalta se sisältää magnesiumkloridia ja kaliumsulfaattia. Nämä yhdisteet stimuloivat fenotyyppistä ilmentymistä, joka liittyy Pseudomonas aeruginosa erilaisia ​​pigmenttejä tuottavien aineiden joukossa: pyosyaniini, pioverdin, piorubiini, piomelaniini ja fluoreseiini. Lopuksi se sisältää agar-agaria, joka antaa sille kiinteän konsistenssin.

tulkinta

Tässä agarissa saadun kasvun tulkinta tehdään seuraavasti:

Pyöreiden, sileiden kolonioiden, joissa on säännölliset reunat, havainto, joka tuottaa sinivihreitä, vihreitä, ruskeita tai punertavia pigmenttejä sekä hedelmäisen hajun (aminoasetofenoni) emissiota, on oletettu tulos tämän bakteerin läsnäolosta mainitussa näytteessä..

Toisaalta se osoittaa P. aeruginosa kirkkaan kellertävän vihreän pigmentin havainnointi pesäkkeillä, kun levy altistetaan ultraviolettivalolle.

On huomattava, että jokainen havaittu väri johtuu spesifisen pigmentin tuotannosta. Sinivihreä pigmentti vastaa pyosyaniinin, vihreän ja pioverdinin, punertavan ja piorrubiinin, ruskean ja piomelaniinin sekä kirkkaan kellertävän vihreän fluoresenssin tuottamista ultraviolettivalossa fluoressiiniin..

valmistelu

Punnitaan 43 g kuivattua väliainetta ja liuotetaan tislattuun veteen. Lisätään 10 ml glyserolia. Ota seos lämmönlähteeseen. Anna kiehua muutaman minuutin ajan, kunnes se on täysin liuennut.

Autoklaavi 121 ° C: ssa 15 minuuttia. Anna seistä ja käyttää steriileissä Petri-astioissa, kun lämpötila on noin 50 ° C.

Annetaan jähmettyä, kääntää, tilata leikkureihin ja säilytä jääkaapissa, kunnes se on käytössä. Cetrimidiagarilevyjen istuttamiseksi ne on poistettava jääkaapista etukäteen ja annettava ottaa huoneenlämpötila..

Väliaineen lopullisen pH: n tulisi olla 7,2 ± 0,2.

Dehydratoidun väliaineen väri on beige ja valmiste on läpinäkymätön valkoinen.

sovellukset

Cetrimide-agaria voidaan käyttää istuttamaan kaikenlaisia ​​näytteitä, joissa Pseudomonas aeruginosa. Siksi se on hyödyllinen kaikilla mikrobiologian aloilla (ympäristö, teollisuus, kliininen, vesi ja ruoka).

On erittäin tärkeää analysoida sairaalaympäristöjä ja siten pystyä soveltamaan korjaavia sovitteluja, koska tämä mikro-organismi saavuttaa potilaat potilaan käyttämien laitteiden, lääkkeiden, liuosten ja saastuneiden tarvikkeiden kautta..

Tällä tavalla mikro-organismi voi infektoida immunosuppressoitujen potilaiden alempia hengitysteitä, virtsateitä ja haavoja.

Colony count voidaan myös tehdä P. aeruginosa mikrobien raja-arvotesteissä.

istutettu

Cetrimidiagaria voidaan käyttää primaariviljelmänä. Levy siirrostetaan johonkin sen reunoista ja sieltä se jaetaan levyn kautta muuhun levyyn. Nestemäiset näytteet voidaan kylvää pinnalle drigalski-lastalla.

Levyjä inkuboidaan aerobioosissa 37 ° C: ssa 24 tunnin inkuboinnin ajan.

rajoituksia

-Pieni prosentti. \ T  Pseudomonas aeruginosa älä tuota pyosyaniinia, joten voit tulkita vääriä negatiivisia.

-Jotkin kliinisesti tärkeät Pseudomonas-lajit estetään tässä elatusaineessa.

-Huolimatta kuvatuista ominaisuuksista Pseudomonas aeruginosa, ne on vahvistettava lisäkokeilla. Testi, jonka ei pitäisi puuttua, on oksidaasin testi, sen pitäisi olla positiivinen.

-Jotkut enterobakteerit voivat kasvaa tässä elatusaineessa ja kehittää keltaista pigmenttiä, mutta se eroaa Pseudomonas aeruginosa jossa levyä altistettaessa ultraviolettivalolle ei ole fluoresenssia.

-Serratia marcescens onnistuu kehittämään ja tuottamaan vaaleanpunaisen pigmentin.

-Jos cetrimidiagarilla siemennettyjä plakkeja paljastetaan jonkin aikaa huoneenlämpötilassa,. \ T P. aeruginosa ne voivat menettää ultraviolettivalossa havaitun fluoresenssin, mutta ominaisuus otetaan talteen, jos sitä inkuboidaan uudelleen 37 ° C: ssa.

Laadunvalvonta

Cetrimidi-agarin moitteettoman toiminnan testaamiseksi voidaan käyttää kontrollikantoja, kuten: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 ja Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Odotetut tulokset ovat:

  • että P. aeruginosa hyvä kasvu, sininen-vihertävä pigmentti ja positiivinen fluoreseiini.
  • S. maltophilia ja S. aureus estetään osittain tai kokonaan.
  • On odotettavissa, että Escherichia coli täysin estetty.

viittaukset

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Kliinisten isolaattien fenotyyppinen ja serologinen karakterisointi Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Laboratories Conda Pronadisa. Cetrimide-agar-emäs. 2014. Saatavilla osoitteessa: condalab.com
  3. Laboratories Britania. Cetrimida-agari. 2015. Saatavilla: britanialab.com
  4. BD Laboratories BD Pseudosel-agar (Cetrimide-agar). 2013. Saatavilla osoitteessa: bd.com
  5. Francisco Soria Melguizo Laboratory, C.A. Cetrimidiagar. 2009. Saatavilla osoitteessa: http://f-soria.es