Mikä on yksinkertainen värjäys? Suosituimmat ominaisuudet



yksinkertainen värjäys on nopea ja yksinkertainen värjäysprosessi, jossa käytetään yhtä väriainetta, minkä vuoksi sitä kutsutaan yksinkertaiseksi. Sitä käytetään pääasiassa näytteessä olevien solujen morfologian ja organisoinnin määrittämiseen.

Luonnollisesti soluilla ei ole väriä, joten on tarpeen tehdä ne näkyviksi jollakin tavalla, kun niitä havaitaan mikroskoopissa.

On tärkeää korostaa, että yksinkertaisessa värjäyksessä käytettävien väriaineiden on oltava emäksisiä positiivisella varauksella (kationisella), jotta ne voivat spontaanisti sitoutua soluseinään ja sytoplasmaan.

Nämä solurakenteet latautuvat negatiivisesti. Siksi väriaine, positiivisesti varautunut, houkuttelee soluihin ja sitoutuu niihin spontaanisti. Näin ollen kaikki näytteessä olevat solut värjätään nopeasti.

Väriaineet, joita käytetään yksinkertaisessa värjäys

Mikrobiologian laboratoriossa voidaan käyttää useita perusvärejä. Käytetyimmät ovat:

- Metyleenisininen.

- Kristallivioletti.

- Malakiitti vihreä.

- Perusfuksiini.

Kaikki nämä väriaineet toimivat hyvin bakteereissa, koska niillä on positiivisesti varautuneita (kationisia) ioneja (kromoforeja).

Useimpien näiden väriaineiden värjäysaika on suhteellisen lyhyt. Ne vaihtelevat yleensä 30 sekunnista 2 minuuttiin värin affiniteetin mukaan.

On tärkeää muistaa, että ennen näytteen värjäämistä yksinkertaisella värjäyksellä se on laajennettava ja kiinnitettävä lasilevyyn (liukukappale); Laajennettua ja kiinteää näytettä kutsutaan tahraksi.

6 vaihetta yksinkertaisen värjäyksen suorittamiseksi

Vaihe 1

Aseta liukukappale värjäys telineeseen ja laita haluttu väriaine. Jätä vastaava aika.

Tavallisesti yksinkertainen värjäys kestää muutaman sekunnin tai muutaman minuutin käytetyn värin mukaan.

havainto

Tässä vaiheessa on tärkeää, että käytetty väriaine ei ylitä suositeltua aikaa, koska levylle voi muodostua kiteitä, jotka tuottavat "artefakteja", jotka vääristävät solujen morfologiaa..

Vaihe 2

Huuhtele liuoksen rasvaa varovasti tislatulla vedellä pullosta tai myös hitaasti virtaavasta vesijohtovedestä, kunnes valuminen muuttuu läpinäkyväksi. Tämä kestää yleensä 5–10 sekuntia.

havainto

Älä levitä vesivirtaa suoraan tahraan, jotta se ei vahingoita näytettä.

Jos sinulla ei ole tislattua vettä, voit käyttää vesijohtovettä ilman ongelmia, koska se ei vaikuta värjäystulokseen.

Vaihe 3

Kuivaa liuos imukykyisillä paperipyyhkeillä yhteen suuntaan ja ilman hankausta. Varmista, että liukun pohja on puhdas.

Vaihe 4

Tarkkaile mikroskoopissa värjättyä tahraa. Aloita kaikkein kaukaisimmista tavoitteista paikan määrittämiseksi, jota haluat tarkkailla tarkemmin. Muuta tavoitetta lähemmäksi ja lähemmäksi näytettä.

havainto

Suurimman suurennuksen omaavan linssin (tavallisesti 100X) käyttöä varten on käytettävä upotusöljyä, koska se auttaa valoa tunkeutumaan paremmin ja kuva on terävämpi. Peitelevyn käyttäminen ei ole välttämätöntä.

Vaihe 5

Lopuksi hävitä kaikki näytteet sopivaan astiaan, joka on asianmukaisesti merkitty "biohazard".

viittaukset

  1. (2001). Mikrobiologiset sovellukset: Laboratoriokäsikirja yleisessä mikrobiologiassa (8 th toim.). McGraw-Hill-yhtiöt.
  2. Harisha, S. (2006). Johdatus käytännön biotekniikkaan (1st). Palomuuri.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Bakteerien alustava värjäys: Yksinkertaiset tahrat. Mikrobiologian nykyiset protokollat, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamon mikrobiologian perusteet (10th). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratorioharjoitukset mikrobiologiassa (5 th). McGraw-Hill-yhtiöt.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Mikrobiologian periaatteet (1st). Tata McGraw-Hill koulutus.