Nepelometria siinä, mitä se koostuu ja sovellukset
nefelometriasta koostuu hiukkasten (liuoksessa tai suspensiossa) aiheuttaman säteilyn mittaamisesta, jolloin mitataan hajallaan olevan säteilyn teho muussa kuin tulevan säteilyn suunnassa.
Kun suspensiossa oleva hiukkanen saavutetaan valonsäteellä, on osa heijastuvasta valosta, toinen osa imeytyy, toinen osa siirretään ja loput lähetetään. Siksi kun valo iskee läpinäkyvään väliaineeseen, jossa on kiinteiden hiukkasten suspensio, suspensiota havaitaan samea.
indeksi
- 1 Mikä on neelometria??
- 1.1 Säteilyn hajoaminen liuoksen hiukkasista
- 1.2 Nepelometri
- 1.3 Poikkeamat
- 1.4 Metrologiset ominaisuudet
- 2 Sovellukset
- 2.1 Immuunikompleksien havaitseminen
- 2.2 Muut sovellukset
- 3 Viitteet
Mikä on nefelometria??
Säteilyn hajoaminen liuoksen hiukkasilla
Tällä hetkellä, jolloin valonsäde osuu aineen hiukkasiin suspensiossa, säteen etenemissuunta muuttaa sen suuntaa. Tämä vaikutus riippuu seuraavista näkökohdista:
1.Partikkelin mitat (koko ja muoto).
2. Suspensio (pitoisuus) \ t.
3. Valon aallonpituus ja intensiteetti.
4. Tulevan valon etäisyys.
5. Tunnistuskulma.
6. Välineen taitekerroin.
nefelometriä
Neelometri on väline, jota käytetään mittaamaan nestemäiseen näytteeseen tai kaasuun suspendoituja hiukkasia. Joten valokenno, joka on sijoitettu 90 ° kulmaan valonlähteen suhteen, havaitsee suspensiossa olevien hiukkasten säteilyn.
Hiukkasten heijastama valo fotosolun suhteen riippuu myös hiukkasten tiheydestä. Kaaviossa 1 esitetään nefelometrin muodostavat perusosat:
. Säteilylähde
Neelometriassa on äärimmäisen tärkeää, että säteilylähde on korkea. Eri tyyppejä ovat muun muassa ksenonlamput ja elohopeahöyrylamput, volframihalogeenilamput, lasersäteily, mm..
B. Monokromaattorijärjestelmä
Tämä järjestelmä sijaitsee säteilyn lähteen ja kyvetin välissä siten, että tällä tavoin vältetään eri aallonpituuksilla olevan säteilyn esiintyvyys haluttuun säteilyyn verrattuna..
Muuten fluoresenssireaktiot tai lämmitysvaikutukset liuoksessa aiheuttavat poikkeamia mittauksesta.
C. Lukukyvetti
Se on yleensä prismaattinen tai sylinterimäinen säiliö, ja sen koko voi olla erilainen. Tässä on ratkaisu tutkimuksessa.
D. ilmaisin
Ilmaisin sijaitsee tietyllä etäisyydellä (tavallisesti hyvin lähellä säiliötä) ja on vastuussa suspensiossa olevien hiukkasten hajaantuneen säteilyn havaitsemisesta.
E. Lukujärjestelmä
Yleensä se on sähköinen kone, joka vastaanottaa, muuntaa ja käsittelee tietoja, jotka tässä tapauksessa ovat suoritetusta tutkimuksesta saatuja mittauksia.
poikkeamat
Jokaiselle mittaukselle asetetaan prosenttiosuus virheestä, joka johtuu pääasiassa seuraavista:
Saastuneet kauhat: kyvetissä mikä tahansa tutkimusliuoksen ulkopuolinen aine, joka on kyvetin sisä- tai ulkopuolella, vähentää säteilevää valoa ilmaisimen reitillä (vialliset kyvetit, kyvetin seiniin tarttunut pöly).
häiriöt: jonkin mikrobiologisen kontaminantin tai sameuden läsnäolo hajottaa säteilyenergiaa, mikä lisää dispersion intensiteettiä.
Fluoresoivat yhdisteet: nämä ovat yhdisteitä, jotka aiheuttavat säteilyn aiheuttamia virheellisiä ja suuria dispersion tiheyden lukemia.
Reagenssien säilyttäminen: järjestelmän riittämätön lämpötila saattaa aiheuttaa tutkimukselle epäedullisia olosuhteita ja houkutella sameita reagensseja tai saostumia.
Sähkötehon vaihtelut: jotta vältytään siitä, että tuleva säteily on virheen lähde, jännitteen stabilointiaineita suositellaan yhtenäiselle säteilylle.
Metrologiset ominaisuudet
Koska havaitun säteilyn säteilyteho on suoraan verrannollinen hiukkasten massakonsentraatioon, on neelometristen tutkimusten teoriassa korkeampi metrologinen herkkyys kuin muilla vastaavilla menetelmillä (kuten turbidimetria).
Lisäksi tämä tekniikka vaatii laimennettuja liuoksia. Tämä mahdollistaa sekä absorptio- että heijastusilmiöiden minimoinnin.
sovellukset
Nefelometriset tutkimukset ovat erittäin tärkeässä asemassa kliinisissä laboratorioissa. Sovellukset vaihtelevat akuutin vaiheen, komplementin ja koagulaation immunoglobuliinien ja proteiinien määrittämisestä.
Immuunikompleksien havaitseminen
Kun biologinen näyte sisältää mielenkiinnon kohteena olevan antigeenin, se sekoitetaan (puskuriliuoksessa) vasta-aineella immuunikompleksin muodostamiseksi.
Nefelometria mittaa valon määrää, joka on hajallaan antigeeni-vasta-ainereaktiolla (Ag-Ac), ja tällä tavoin havaitaan immuunikomplekseja.
Tämä tutkimus voidaan suorittaa kahdella menetelmällä:
Lopullisen pisteen neelometria:
Tätä tekniikkaa voidaan käyttää päätepisteen analysointiin, jossa tutkitun biologisen näytteen vasta-ainetta inkuboidaan 24 tuntia.
Ag-Ac-kompleksi mitataan käyttäen nepelometriä ja hajaantuneen valon määrää verrataan samaan mittaukseen, joka suoritettiin ennen kompleksin muodostumista.
Kineettinen neelometria
Tässä menetelmässä kompleksin muodostumisen nopeutta seurataan jatkuvasti. Reaktionopeus riippuu näytteessä olevan antigeenin pitoisuudesta. Tällöin mittaukset suoritetaan ajan funktiona, joten ensimmäinen mittaus tehdään ajankohtana "nolla" (t = 0).
Kineettinen neelometria on eniten käytetty tekniikka, koska tutkimus voidaan suorittaa 1 tunnin kuluessa loppupisteen menetelmän pitkän ajanjaksosta. Dispersiosuhde mitataan heti reagenssin lisäämisen jälkeen.
Siksi, kunhan reagenssi on vakio, läsnä olevan antigeenin määrä katsotaan suoraan verrannolliseksi muutosnopeuteen.
Muut sovellukset
Neelometriaa käytetään yleensä veden kemiallisen laadun analysoinnissa, selvyyden selvittämisessä ja sen käsittelyprosessin ohjaamisessa.
Sitä käytetään myös ilman pilaantumisen mittaamiseen, jossa hiukkasten pitoisuus määritetään tuottamasta dispersiosta tulevassa valossa..
viittaukset
- Britannica, E. (s.f.). Nepelometria ja turbidimetria. Palautettu britannica.comista
- Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetria ja nepelometria. Haettu osoitteesta pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Palautettu osoitteesta technochemical.com
- Morais, I. V. (2006). Turbidimetrinen ja nepelometrinen virtausanalyysi. Haettu osoitteesta repositorio.ucp.p
- Sasson, S. (2014). Neelometrian ja turbidimetrian periaatteet. Haettu osoitteesta notesonimmunology.files.wordpress.com
- Stanley, J. (2002). Immunologian ja serologian perusteet. Albany, NY: Thompson Learning. Haettu osoitteesta books.google.co.ve
- Wikipedia. (N.D.). Nefelometria (lääke). Haettu osoitteesta en.wikipedia.org