Kromatogrammi sille, mitä se on ja tyypit



kromatogrammi on kaksiulotteinen graafinen tietue, joka on saatu absorboivassa väliaineessa, joka osoittaa aineiden erottamisen kromatografialla. Kromatogrammissa muodostuu näkyvä kuvio, piikit tai täplät, jotka heijastavat seoksen komponenttien fyysistä erottumista.

Alempi luku on kromatogrammi, jossa on kolme piikkiä, A, B ja C, kolmesta näytteen komponentista, jotka on erotettu kromatografialla. Havaitaan, että kullakin kolmesta piikistä on erilainen korkeus ja sijainti kromatogrammin aika-akselissa.

Ordinaattien akseli tai Y tallentaa signaalin voimakkuuden tiedot (millivolteina mV tässä tapauksessa). Esittää ilmaisimesta riippuen jonkin aineen tai seoksen erillisen komponentin jonkin fyysisen ominaisuuden rekisterin.

Piikin korkeus on verrannollinen näytteen erotetun komponentin pitoisuuteen optimaalisessa järjestelmässä. Siten esimerkiksi on helppo visualisoida, että komponentti B on suurempi kuin A ja C.

Abskissa- tai X-akselilla näytteen tai seoksen komponenttien retentioaika on esitetty. Se on aika, joka kuluu näytteen ruiskuttamisesta siihen asti, kunnes se pysähtyy, ja se on erilainen kunkin puhtaan aineen osalta.

indeksi

  • 1 Mikä on kromatogrammi??
    • 1.1 Aineiden tunnistaminen
    • 1.2 Aineiden puhtauden luokitus
    • 1.3 Aineiden määritys
  • 2 tyyppiä
    • 2.1 Kromatogrammit paperilla tai ohuella kalvolla
    • 2.2 Detektorien tuottamat kromatogrammit
  • 3 Viitteet

Mikä on kromatogrammi??

Se muodostaa koko kromatografiaprosessin lopullisen kirjauksen. Tästä saadaan analyyttisesti kiinnostavia parametreja. Tämä voidaan hankkia sähköisenä tiedostona, painettuina histogrammeina tai prosessitukena; esimerkiksi paperilla.

Y-akseli syntyy signaalinilmaisimista tai vasteen intensiteetistä, kuten spektrofotometreistä. Aikojen optimaalinen analyysi, saatujen piikkien tai kohtien ominaisuudet ovat välttämättömiä; muun muassa koko, sijainti, väri.

Kromatogrammien analyysit vaativat yleensä kontrollien tai standardien käyttöä, identiteettiaineita ja tunnettua konsentraatiota. Näiden säätimien analyysi sallii tutkittavan näytteen komponentteja kuvaavien näytteiden vertailun.

Kromatogrammissa voidaan tarkkailla ja analysoida, miten seoksen komponenttien erottaminen suoritettiin. Sen optimaalinen tutkimus mahdollistaa aineen tunnistamisen sen puhtauden osoittamiseksi, seoksen sisältämien aineiden määrän kvantifioimiseksi muun muassa.

Poistetut tiedot voivat olla laadullisia; esimerkiksi kun aineet tunnistetaan ja niiden puhtaus määritetään. Kvantitatiivinen informaatio liittyy seoksen komponenttien lukumäärän ja erotetun analyytin konsentraation määrittämiseen.

Aineiden tunnistaminen

Analysoimalla kromatogrammin tulokset eri aineita voidaan tunnistaa vertaamalla retentioaikoja tunnettujen aineiden pitoisuuksiin. Se voidaan havaita, jos tutkittavat aineet kulkevat samalla etäisyydellä, jos niillä on sama aika kuin tunnetut aineet.

Kromatogrammilla voidaan esimerkiksi havaita ja tunnistaa uriinissa lääkeaineiden metaboliitteja, kuten stimulantteja ja steroideja. Se on tärkeä tuki joidenkin vastasyntyneiden geneettisten häiriöiden tuottamien metaboliittien tutkimuksessa ja tutkimuksessa.

Kromatogrammi helpottaa juomavedessä olevien halogenoitujen hiilivetyjen havaitsemista muiden aineiden joukossa. Se on välttämätöntä laadunvalvonnan laboratorioanalyysissä, koska sen avulla voidaan havaita ja tunnistaa eri tuotteissa esiintyvät epäpuhtaudet.

Aineiden puhtauden luokittelu

Kromatogrammissa voidaan erottaa puhtaat ja epäpuhtaat aineet. Puhdas aine tuottaa yhden piikin kromatogrammissa; kun epäpuhdas aine tuottaa kaksi tai useampia piikkejä.

Säätämällä riittävästi kromatografiaolosuhteita voidaan estää kaksi ainetta muodostamasta yhtä piikkiä.

Aineiden määritys

Analysoimalla kromatogrammin piikkien pinta-ala voidaan laskea näytteen komponenttien pitoisuus.

Näin ollen piikin pinta-ala on verrannollinen näytteessä olevan aineen määrään. Nämä kvantitatiiviset tiedot saadaan erittäin herkissä järjestelmissä, kuten sellaisissa, jotka tuottavat esimerkiksi kaasu- tai nestekromatografioita.

tyyppi

Yksi kromatogrammien luokituksista liittyy läheisesti erilaisiin kromatografiatyyppeihin, jotka tuottavat vastaavan kromatogrammin.

Detektorien suoritusolosuhteista riippuen kromatogrammi vaihtelee muun muassa sisällön ja laadun mukaan.

Kromatogrammit paperilla tai ohuella kalvolla

Kromatogrammi voidaan tuottaa suoraan paperilla tai ohuella kalvolla, joka osoittaa suoraan näytteen komponenttien jakautumisen tai jakautumisen.

Se on erittäin hyödyllinen värillisten aineiden, joilla on luonnollisia pigmenttejä, kuten klorofylli, erottamiseen ja tutkimukseen. Se voidaan altistaa kehitysprosesseille, jos aineilla ei ole luonnollista väriä, ja se on hyödyllinen laadullisiin tutkimuksiin.

Detektorien tuottamat kromatogrammit

Kromatogrammi voidaan saada myös käyttämällä ilmaisinta, joka tallentaa kromatografian vasteen, ulostulon tai lopullisen signaalin. Kuten edellä mainittiin, tämä ilmaisin on tavallisesti spektrofotometri, massaspektrometri, automaattiset sekvensoijat, sähkökemikaalit..

Kromatogrammit, jotka on muodostettu sarakkeissa, olivatpa ne kaasuja tai nesteitä, samoin kuin ne, joilla on suuri resoluutio ohuessa kerroksessa, käyttävät ilmaisimia.

Detektorin tyypistä riippuen kromatogrammi voidaan luokitella erotukseksi tai kiinteäksi, riippuen ilmaisimen vasteesta..

Differentiaalinen kromatogrammi

Eri-ilmaisin mittaa jatkuvasti kromatogrammin vastesignaalia, kun taas integroidut ilmaisimet mittaavat kumulatiivisesti vastaavan signaalin.

Eri-kromatogrammi on differentiaali-ilmaisimella saatu kromatogrammi. Näistä ilmaisimista voidaan mainita esimerkiksi spektrofotometrit ja sähköjohtavuuden muutosten ilmaisimet.

Tämäntyyppinen kromatogrammi on osoittanut anionien erottumisen näytteestä, joka on havaittu epäsuoralla fotometrialla. Myös samat tulokset on saatu ionien tutkimiseksi, esimerkiksi lopullisella detektoinnilla johtomittauksella.

Ylempi kuvaaja esittää esimerkin differentiaalikromatogrammista, joka on saatu automaattisilla DNA-sekvensoijilla (deoksiribonukleiinihappo). Kaaviossa näkyy selvästi neljän värin huiput, yksi väri kullekin DNA-typpipohjalle.

Tietokoneistetun ohjelman tuella analysoitujen DNA-emästen sekvenssin tulkinta helpottuu sekä monimutkaisempia analyyttejä..

Kattava kromatogrammi

Integroitu kromatogrammi vastaa integroidun ilmaisimen tuottamaa kromatogrammaa. Tässä kromatogrammissa todetaan yksittäisen tutkittavan komponentin tuotos. Huippuja ei saada kuten differentiaalissa.

Integroidussa kromatogrammissa saadaan tietue, jonka muoto on kuvattu vaiheena. Tämä muoto on kromatogrammin osa, joka vastaa yksittäisen aineen määrää, joka poistuu kolonnista.

viittaukset

  1. Bhanot, D. (2013). Miten lukea kromatogrammiin? Haettu osoitteesta lab-training.com
  2. Carey, F. A. (2006). Orgaaninen kemia Kuudes painos. Mc Graw Hill
  3. Kromatografia tänään. (2014). Mikä on kromatogrammi? Haettu osoitteesta chromatographytoday.com
  4. Mathias, J. (2018). Aloittelijan opas: Miten tulkitaan kaasukromatografia-kromatografia Massaspektrometria-tulokset. Haettu osoitteesta innovatechlabs.com
  5. Espanjan kromatografiayhdistys ja siihen liittyvät tekniikat. (2014). Kromatogrammi. Palautettu: secyta.es
  6. Wikipedia. (2019). Paperikromatografia. Haettu osoitteesta: wikipedia.org